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ELISA試劑盒從免疫原性及不亂性等方面臨5種抗原進行比照,*選擇活化酯法組成的BSA-SM/b作為免疫抗原,通過雜交瘤技術獲得1株能不亂分泌抗鏈霉素特異性單克隆抗體的雜交瘤細胞株5C10。通過試驗比照了5種樣品處理方法,ELISA試劑盒選擇用Careez法處理并4倍稀釋后用于測定。為探究一種能夠敏捷有用的查看牛奶中鏈霉素殘留的方法,本研討選用單克隆抗體技術等技術,合工抗原,制備出抗鏈霉素單克隆抗體,建立了查看牛奶中SM殘留的ELISA測定法,組建成鏈霉素敏捷查看ELISA試劑盒并進行了優(yōu)化和實踐使用。
ELISA試劑盒作為一種活絡、敏捷、特異性強的方法,酶聯(lián)免疫吸附測定法正逐漸使用于藥物的殘留查看,海內外現(xiàn)已建立了多種查看牛奶中鏈霉素留的理化查看方法,當然有些方法比照活絡、,但由于方法凌亂、耗時長、花費大、技術懇求原因而不適合大批量樣品的選擇。制備的腹水效價為1∶1280000,蛋白濃度為26.2mg/ml,與其他抗菌藥物的交叉反應率均低于0.1%。規(guī)范曲線的批內變異系數(shù)為11.87%,均勻批間變異系數(shù)為8.017%。建立ELISA試劑盒規(guī)范曲線的線性方程為y=1.8061-0.4932x(線性規(guī)模25~2500ng/ml),其LOD為8.11ng/ml,低于劃定的牛奶中鏈霉素zui低殘留定量200ng/ml。可是不規(guī)范用藥會引起畜禽產品尤其是泌乳動物乳汁中的藥物殘留,對人類的健康構成匿伏危害。