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ELISA試劑盒靈敏度高是一大優(yōu)點(diǎn),而這其實(shí)也是和檢測樣本有些關(guān)聯(lián)的,我們一般說來,如果待測樣本中目標(biāo)蛋白的濃度比較高,則對靈敏度要求相對小一些。如果待測樣本中目標(biāo)蛋白的濃度比較低,則必須考慮靈敏度的問題。
一般來說,試劑盒曲線上的zui小濃度是比較準(zhǔn)確的,低于這個(gè)值因?yàn)榕c曲線是個(gè)“S”型結(jié)構(gòu)有關(guān),所以結(jié)果是有偏差的,是一種估算。再加上實(shí)驗(yàn)誤差,所以達(dá)不到理想的效果。建議選擇試劑盒時(shí),應(yīng)該看曲線上zui小的濃度值,而不是試劑盒上寫的靈敏度。
那么ELISA試劑盒檢測哪些范圍呢?一般說來,診斷試劑的檢測范圍以ng/ml計(jì)。而常見的科研試劑盒中的樣本中的目標(biāo)蛋白,范圍可隨樣本的類型而變化。所以實(shí)驗(yàn)前應(yīng)通過文獻(xiàn)和預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法確定樣本是否在所購的范圍內(nèi),是很重要的步驟。
ELISA試劑盒如果不在檢測范圍內(nèi),分兩種情況對待:
A、如果樣本中目標(biāo)蛋白太低,需找相應(yīng)靈敏度更高的試劑盒來檢測或濃縮樣本。
B、如果樣本中目標(biāo)蛋白太高,則需要進(jìn)一步稀釋后進(jìn)行檢測。